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        Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?

        更新時間:2025-06-17    點擊次數(shù):830

          Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?

          以下是天津本生判斷酶標板是否失效的全面檢測方法及標準,涵蓋物理檢查、功能測試和實驗驗證:

          一、?物理檢查?

          外觀檢測?

          觀察板孔是否有劃痕、變形或污染,破損的板孔會導致液體分布不均。

          檢查密封性:未密閉保存的酶標板可能因吸附水分或干燥失效。

          透光率測試?

          用酶標儀檢測空板吸光度(主波長450nm,參考波長630nm),若透光率不均(CV值>10%)提示板子性能下降。

          

        Elisa實驗:如何判斷酶標板是否失效?


          二、?功能驗證?

          蛋白吸附能力測試?

          包被50μg/mL IgG過夜,BCA法檢測吸附前后蛋白濃度差,吸附量下降>20%表明板子失效。

          空白值檢測?

          加入緩沖液后測OD值,空白孔OD>0.2(夾心法)提示非特異性吸附增加。

          三、?實驗驗證?

          標準曲線測試?

          使用已知濃度標準品檢測,若線性相關系數(shù)(R值)<0.99或梯度顯色異常,提示板子失效。

          復孔CV值>8%表明板孔間一致性差。

          顯色反應驗證?

          正常TMB底物顯色應為藍色→黃色(終止后),若顯色延遲或顏色異常需更換板子。

          四、?保存條件追溯?

          商品化板需4℃密閉保存,自包被板有效期更短;若長期暴露于高溫或濕度>60%環(huán)境,建議棄用。

          五、?操作對照?

          同步使用新板對比檢測,若舊板結果偏差>15%則判定失效。

          通過以上方法可綜合評估酶標板狀態(tài),失效板需及時更換以避免實驗誤差。

          注:以上資料僅供參考,如需更詳細說明,可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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